最新精液的稀释(1)课件PPT.ppt 31页

'精液的稀释(1) 精液稀释的步骤1.稀释前的准备工作2.精液直观指标测定3.活力测定4.密度测定5.精液的稀释6.精液的分装7.精液的保存8.实验器材的清洗、消毒 1.稀释前的准备工作①稀释液的制备每天进入实验室的第一件事就是制作稀释液。稀释液有三个部分组成：稀释粉、二重蒸馏水、庆大霉素。稀释粉：蒸馏水：庆大霉素=50g：1L：8万IU当天制作当天用，不可放到第二天继续使用。制作好的稀释液放入37℃的恒温水浴箱里备用。 3.活力测定将精液轻轻摇动或用洁净的玻璃棒搅动，用微量移液器或玻璃棒取精液20uI，放于预温后载玻片中央，盖上盖坡片，在载物台上预温片刻，用推进器将载玻片推至物镜下，在100和400倍下进行观察。如果精子无凝集、出现大群运动波，无明显死亡精子。应为“很好”；如果精液出现大群波动，但有少量死亡精子应为“好”；如果有成群运动，但有精子凝集现象，应为“一般”；有大片凝集或死亡，但有部分精子在正常运动应为“差”。 3.活力测定注意事项：（1）显微镜的光源光圈应尽量小些，光线过强，就无法看清精子；（2）每次调节显微镜焦距时，都应先将载物台先调到与物镜最近的距离，但不能使载玻片与物镜接触，然后缓慢放低载物台，同时从目镜观察，直到观察到精子为止；观察活力时应轻轻调节微调，以观察各个层次的精子活动情况。 4.密度测定精子密度：指每毫升精液中含有的精子量，它是用来确定精液稀释倍数的重要依据。正常公猪的精子密度为2.0～3.0亿／毫升，有的高达5.0亿个精子/毫升。利用光电比色法，以精子对光通透性差为依据，用分光光度计读出一个数字，然后再根据事先准备好的标准曲线确定精子的密度。 4.密度测定 4.密度测定具体操作步骤：首先打开密度仪→放入专用玻璃管→在玻璃管中加入稀释液至刻度线→盖上盖并进行调零→取下盖子用移液枪吸取200微升精液加入到玻璃管内混匀→盖上盖子并按确认键经行测量→利用测量值从密度表中查出对应精液密度 经过品质检查合格的精液应立即进行稀释。①确定精液的稀释份数与所加入稀释液的量。一般要求每份输精剂量为80ml，含有效精子40亿。例如：采得一头公猪的精液量为200ml，通过精液质量检查确定活率为0.7，其密度为2.0亿/ml，依据公式可得：理论稀释份数=200mlⅹ2.0亿/mlⅹ0.7÷40亿/份=8.7份,实际稀释份数=可根据实际情况在理论数的基础上保守约为8份。稀释液量=80ⅹ8-200=440ml。②稀释前，稀释液的温度应和精液接近，相差不能超过1℃。根据计算好的稀释头份，用量杯量取稀释液的体积，或简单一点，按1ML精液或稀释液约等于1克，用精密电子天平直接称量，国外专业公猪站多采用此法。5.精液的稀释 5.精液的稀释③稀释时，将稀释液顺着盛放精液的量杯壁慢慢注入精液，并不断用玻璃棒搅拌，以促进混合均匀；不能将稀释液直接倒入精液，因精子需要一个适应过程。还有的做法是，先将稀释液慢慢注入精液一部分，搅拌均匀后，再将稀释后的精液倒入稀释液中，这样有利于提高精子的适应能力和稀释精液的均匀混合。④精液稀释的成败，与所用仪器的清洁卫生有很大关系。所有使用过的烧杯、玻璃棒及温度计，都要及时用蒸馏水洗涤，并进行高温消毒，是稀释后的精液能保证适期保存、利用的重要条件。 6.精液的分装①精液的分装，有瓶装和袋装两种，装精液用的瓶子和袋子均为对精子无毒害作用的塑料制品。瓶装的精液分装时简单方便，易于操作，但输精时需人为挤、压或瓶底开口，因瓶子有一定的固体形态；袋装的精液分装一般需要专门的精液分装机，用机械分装、封口，但输精时因其较软，一般不需人为挤压。瓶子一般上面均有刻度，最高一刻度为80ML，袋子一般为80ML。②分装后的精液，要逐个粘贴标签，一般一个品种一个颜色，便于区分。注意要在上面标明公猪耳号、采精处理时间、稀释后密度、经手人等，并将以上各项登记到记录本上，以备查验。 6.精液的分装 7.稀释后精液的保存①分装后的精液，不能立即放入17℃左右的恒温冰箱内，应先留在冰箱外1小时左右，让其温度下降，以免因温度下降过快而刺激精子，造成死精子等增多。②放入冰箱时，不同品种的公猪精液应分开放置，否则匆忙中容易拿错精液。不论是瓶装的或是袋装的，均应平放，并可叠放。从放入冰箱开始，每隔12小时，要摇匀一次精液，因精子放置时间一长，会大部分沉淀。对于一般猪场来说，可在早上上班，下午下班时各摇匀一次。为了便于监督，每次摇动的人都应有摇动时间和人员的记录。③保存过程中，一定要时时注意冰箱内温度计的变化，以免因意想不到的原因而造成电压不稳而导致温度升高或降低。 8.实验器材的清洗、消毒最后就是把实验器材进行清洗，消毒所有器皿应用对皮肤危害性小的、易洗涤的清洁剂清洗，并用自来水冲净，再用蒸馏水冲洗三至四遍，玻璃用品干燥温度为100－150℃；精液分装管使用后立即用蒸馏水冲洗，然后用75％的乙醇冲洗一遍，沥净水分，再放入消毒柜中100℃消毒1小时。 谢谢 Howtobeagoodopsleader TypicalJD工作职责：1.内部体系建立,领导公司监控/运维体系的建立和实施；2.服务体系建立,建立/实施横向服务（向开发部门,业务部门提供服务）流程和标准；能7X24处理各类应急事件，建立系统化运维流程与相关文件3.全面负责公司IDC机房服务器及各分支机构的前置服务器等架设与正常运行；4.保障部门运维安全，处理运维事故,优化各项维护工作流程，不断降低系统风险； 5.Unix/Linux服务器群(serverfarm)的网络搭建、设置和维护、网络的安全监控、系统性能管理和调试、网络性能管理、快速分析网站相关的技术瓶颈和解决方法、深入了解网站数据的统计分析原理和计算方法；6.全面负责公司运维项目的系统后续升级、扩容需求与资源落实；同时配合开发需要，测试、调整运维平台，提供优化的网站网路；7.公司内系统运维的实施和管理工作，完善公司IT管理规范； 8.将日常机械性手工工作通过工具实现（如服务监控、应用状态统计、服务上线等等），提高效率；9.有运维发展的前瞻眼光，设计并完成运维自动化；10.负责能力计划； Technicaldepth深入理解team里面用到的核心技术LinuxPhpResinNginx/HaproxySquid 出现问题时候的troubleshooting能力别人搞不定的你能搞定Becurious 乐于分享的精神Wiki会议分享Blog自我总结和提升Team里面的地位外界的reputation ProblemmanagerIncidentfollowupRootcauseanalysisActionitemfollowup Team管理Team的工作安排有序，follow适度push120%原则TeamMeeting：会前准备会后notesFollowup 跨team合作不轻易complain其他团队先了解，再评价 LeadByExample帮助teammember解决技术问题 Bepositive态度决定一切 为什么加入高成长公司？1）更有机会尝试学习新的事物，2）有更多晋升的机会，因为许多公司会优先考虑内部员工，3）做平时不敢做的工作，理解自己的极限，4）周围有更有激情的人。◆◆@李开复：2002年，一位30出头的女性去咨询谷歌CEO施密特，她该如何在大公司得到晋升。施密特回答：“不，远离那些杂草！寻找最快成长的公司，因为快速成长创造机会！”当年，她加入了快速成长的谷歌，后来成为副总裁。2008年加入了更快速成长的Facebook成为COO。她就是SherylSandberg.'